?采樣之前必須牢記和強(qiáng)化生物安全細(xì)節(jié),嚴(yán)防交叉污染:做到一頭豬使用一套采樣工具(手套、采血針、棉簽試子等),在不同欄舍或棟舍之間采集時(shí),要做到洗手、消毒、換衣、換鞋。
?健康豬只的排查不建議用血樣。必須使用時(shí),建議使用尾根血拭子,不建議使用前腔靜脈或耳靜脈采血法,這樣可以避免血液對(duì)環(huán)境的污染。
?發(fā)病豬的確診檢測(cè)不建議剖檢取樣,采樣取病死豬分泌物或血液即可。
Ⅱ
采集方法
01
尾根血試子采樣方法
尾根血拭子的采集方法就是尾根處用一次性采血針(一豬一針頭)扎破淺表血管,用棉簽試子沾取適量血樣,一般要求將白色棉簽頭全部沾成紅色即可。采集后棉簽迅速放入封口袋或者事先準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),并盡快送檢。如需保存,則建議冷凍保存。采血處要做嚴(yán)格的止血處理,杜絕血液滴到環(huán)境中造成污染。
02
鼻腔拭子采樣方法
在自然感染情況下,病毒會(huì)最先在鼻腔和唾液中檢測(cè)到,要比病毒在血液中出現(xiàn)的時(shí)間早3~4天。這為拔牙爭(zhēng)取了黃金時(shí)間,可減小豬場(chǎng)損失。
鼻腔試子(可以使用人用的肛門拭子或陰道拭子):用生理鹽水沾濕的長(zhǎng)棉簽(10cm左右),將棉簽拭子輕輕插入豬鼻腔中轉(zhuǎn)動(dòng)進(jìn)行采樣,采樣后將棉簽插回采樣管管中,密封冷藏運(yùn)輸。
03
口腔液采樣方法
? 按采樣頭數(shù)準(zhǔn)備足夠數(shù)量的唾液采集袋和5mL離心管。
? 每個(gè)離心管中加入1mL唾液保護(hù)劑。
? 采樣時(shí)間最好是在早上或下午喂料之前,此時(shí)豬的口腔內(nèi)較干凈。
? 撕開(kāi)包裝袋后注意不要污染包裝袋。
? 待豬咀嚼唾液袋2分鐘后,將唾液采集袋放入原包裝袋中,擠出唾液。
? 將擠出的唾液倒入加有保護(hù)劑的離心管,編號(hào)待檢。
注:一頭豬或者一個(gè)欄使用一個(gè)采集袋,防止交叉污染。
(視頻轉(zhuǎn)自樊福好老師)
04
環(huán)境樣品采樣方法
檢測(cè)環(huán)境樣品的意義非常重大,可以防患于未然,規(guī)避重大風(fēng)險(xiǎn)。但是環(huán)境中的病毒載量一般不高,多為物理性攜帶,所以需要大面積收集樣品,提高檢出率??墒褂?.9%生理鹽水打濕(以不滴水為宜)的無(wú)菌紗布,大面積擦拭采樣位置。收集擠壓后的液體,倒入離心管中,用封口膠密封冷藏送檢。
05
飼料和水
對(duì)于飼料(全價(jià)料或飼料原料)和水的檢測(cè)主要是為了監(jiān)測(cè)飼料和水是否被污染。
飼料采樣方法:在飼料傳送帶上鋪上10*10cm見(jiàn)方紗布,或在出料口懸掛10*10cm見(jiàn)方紗布,經(jīng)過(guò)30~40min的接觸,取下紗布,生理鹽水5mL將紗布洗脫后,將液體轉(zhuǎn)入2mL離心管?;蛉≡虾Y下的粉塵100克置于250mL生理鹽水中浸泡60min,期間間隔10min攪拌一次,取上清液轉(zhuǎn)入2mL離心管。
水樣采樣方法:水源水樣或者污水樣品等液體用一次性無(wú)菌注射器抽取1~2mL,加入離心管中,靜置穩(wěn)定后,取上清進(jìn)行檢測(cè)。
Ⅲ
檢測(cè)方法及頻率
? 到政府指定非瘟檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。
? 檢測(cè)方法推薦熒光定量PCR,核酸提取檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性比核酸免提法高,不推薦使用膠體金試紙條(特異性低)。
? 高風(fēng)險(xiǎn)期可每3天采樣檢測(cè)一次,平常監(jiān)測(cè)可1周一次。
來(lái)源丨黃偉
審核丨多婷
編輯丨陳晗