2015年，紀(jì)念斯隆-凱特琳癌癥中心發(fā)表了一項(xiàng)研究，研究者對(duì)非二代測(cè)序（NGS）技術(shù)檢測(cè)顯示基因變異陰性的31例肺腺癌患者的組織樣本重新進(jìn)行NGS分析，結(jié)果有65%的樣本檢出存在可用藥的基因變異。

并且，部分患者基于檢測(cè)結(jié)果接受了已獲批或NCCN指南推薦的靶向藥藥物治療，并達(dá)到臨床獲益。

無(wú)獨(dú)有偶，一年后，一項(xiàng)韓國(guó)的研究對(duì)51例采用非NGS檢測(cè)提示EGFR/KRAS/ALK陰性的肺腺癌樣本分析后發(fā)現(xiàn)，31%的患者存在NCCN指南推薦的可用藥靶點(diǎn)基因變異。

2017年，一項(xiàng)針對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者的回顧性研究數(shù)據(jù)顯示，在既往傳統(tǒng)單基因檢測(cè)提示EGFR和ALK突變陰性的晚期非小細(xì)胞肺癌患者中，經(jīng)二代測(cè)序（NGS）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)17.4%的患者攜帶至少一個(gè)EGFR或ALK基因變異。

都知道NGS相比傳統(tǒng)基因檢測(cè)方法有明顯的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，但優(yōu)勢(shì)具體有哪些、有多明顯，很多人卻不甚清楚。僅從“假陰性”的可能性上看，NGS無(wú)疑是傳統(tǒng)基因檢測(cè)方式陰性患者的復(fù)檢首選。

每月一次的肺癌指南更新速覽，縱觀整個(gè)9月，二代測(cè)序（NGS）成為關(guān)鍵熱詞。先是歐洲腫瘤醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)（EMSO）發(fā)布了“晚期癌癥患者使用NGS的指導(dǎo)建議”：

再然后，CSCO非小細(xì)胞肺癌專(zhuān)家委員會(huì)也發(fā)布了《二代測(cè)序技術(shù)在NSCLC中的臨床應(yīng)用中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)（2020版）》，這也是繼2018版專(zhuān)家共識(shí)之后，時(shí)隔兩年的再次更新。

國(guó)內(nèi)外兩個(gè)專(zhuān)家共識(shí)、建議，無(wú)疑在最新研究進(jìn)展的基礎(chǔ)上解答了廣大醫(yī)患們關(guān)于基因檢測(cè)、二代測(cè)序（NGS）的疑問(wèn)。共識(shí)和進(jìn)展都有哪些？快來(lái)一起看看吧~

針對(duì)非鱗癌患者，常規(guī)推薦進(jìn)行組織標(biāo)本分子標(biāo)志物檢測(cè)；

針對(duì)肺鱗癌患者，

• 目前尚無(wú)明確的基因檢測(cè)位點(diǎn)和獲批的分子靶向藥物；

• 盡管肺鱗癌患者有4%的EGFR突變率，但尚無(wú)證據(jù)表明肺鱗癌使用EGFR靶向藥能顯著獲益，因此不推薦EGFR檢測(cè)；

• 含有腺癌成分或具有腺癌分化的混合鱗癌的患者，可能攜帶敏感型突變，可從靶向治療中獲益。又特別是較年輕、不吸煙或少吸煙（少于100支/年）的患者。推薦進(jìn)行基因檢測(cè)。

傳統(tǒng)基因檢測(cè)方法在臨床中廣泛應(yīng)用是有原因的，例如操作簡(jiǎn)單、對(duì)技術(shù)人員要求不高，并且單次檢測(cè)成本也較低。

但與NGS相比，傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)存在著不少缺陷：

• 一次只能篩查出有限數(shù)量的基因變異，會(huì)遺漏某些類(lèi)型的基因變異；
• 不能檢測(cè)未知基因變異；
• 不能同時(shí)提供TMB和MSI數(shù)據(jù)；
• 耗竭樣本，影響后續(xù)進(jìn)一步檢測(cè)。

腫瘤突變負(fù)荷（TMB）和微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）是較有潛力的免疫治療相關(guān)分子標(biāo)志物，但傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)卻提供這兩者的數(shù)據(jù)。

單個(gè)基因序貫檢測(cè)還會(huì)帶來(lái)樣本耗竭和檢測(cè)時(shí)間延長(zhǎng)的問(wèn)題，而NGS可以一次性全面測(cè)序，更加快速地為患者治療方案選擇提供依據(jù)，且有助于發(fā)現(xiàn)潛在的耐藥機(jī)制，為下一步治療方案的選擇提供依據(jù)。

在價(jià)格方面，盡管NGS多基因同時(shí)分析的總成本較高，但對(duì)比傳統(tǒng)檢測(cè)方案，單個(gè)基因單個(gè)位點(diǎn)的平均檢測(cè)費(fèi)用卻大大下降。

尤其重要的是，傳統(tǒng)檢測(cè)方法可能導(dǎo)致“假陰性”的結(jié)果，使患者失去精準(zhǔn)治療的激活。因此，新版專(zhuān)家共識(shí)也推薦，常規(guī)基因檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，建議使用NGS進(jìn)行復(fù)檢。

考慮到中國(guó)的特殊情形，對(duì)不可手術(shù)的晚期非小細(xì)胞肺癌患者推薦的首次分子標(biāo)志物檢測(cè)內(nèi)容至少包含：EGFR、ALK、ROS1三個(gè)基因。無(wú)論使用PCR/FISH/NGS方法，建議同時(shí)檢測(cè)三種基因突變。

BRAF/KRAS/NTRK/MET/ERBB2和RET等基因在非小細(xì)胞肺癌中的變異頻率相對(duì)較低，但由于其已有對(duì)于獲批或在研的靶向治療藥物，成為非小細(xì)胞肺癌患者的潛在可靶向治療基因。建議結(jié)合患者的實(shí)際臨床情況，按需求進(jìn)行檢測(cè)。

盡管突變陽(yáng)性的患者不適合免疫治療，但對(duì)于檢測(cè)突變陰性，想要進(jìn)行免疫治療的患者，NGS同樣能提供非常有價(jià)值的信息。

NCCN指南推薦TMB作為新的生物標(biāo)志物，用于篩選納武利尤單抗聯(lián)合伊匹單抗方案和納武利尤單抗單藥治療方案的優(yōu)勢(shì)人群。美國(guó)FDA近期也批準(zhǔn)了帕博利珠單抗用于TMB-H、既往治療后病情進(jìn)展且無(wú)滿(mǎn)意替代治療方案的不可手術(shù)切除或轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤患者。

此外，已有一些研究發(fā)現(xiàn)，某些基因變異與免疫治療療效密切相關(guān)，如KRAS突變和TP53突變的腫瘤可能有更好的免疫療效；抑癌基因STK11缺失突變可能造成免疫治療療效不佳。

因此，對(duì)于需要獲取免疫治療相關(guān)分子標(biāo)志物信息的患者，建議采用NGS檢測(cè)，包括MSI、tTMB、免疫治療正負(fù)向相關(guān)基因和免疫治療超進(jìn)展相關(guān)基因等。

國(guó)內(nèi)外肺癌診療指南對(duì)不可手術(shù)III期及IV期患者推薦的首次分子標(biāo)志物檢測(cè)內(nèi)容

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了解耐藥機(jī)制是合理選擇后續(xù)治療方案的前提。非小細(xì)胞肺癌靶向治療的耐藥機(jī)制復(fù)雜，對(duì)靶向治療耐藥患者再次進(jìn)行廣泛的分子標(biāo)志物檢測(cè)有助于全面分析耐藥機(jī)制，并指導(dǎo)后續(xù)用藥。

并且，對(duì)于接受過(guò)靶向/免疫藥物治療的患者，應(yīng)盡可能使用治療后的樣本。

ESMO專(zhuān)家同時(shí)建議，檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌、小細(xì)胞肺癌、宮頸癌高分化和中分化神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、唾液腺癌、甲狀腺癌和外陰癌的腫瘤突變負(fù)荷（TMB），這些癌癥中的高TMB患者對(duì)免疫治療反應(yīng)較好。

對(duì)于靶向治療，基因檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步使得近10年間新發(fā)現(xiàn)的腫瘤驅(qū)動(dòng)基因不斷增多，推動(dòng)了靶向治療藥物的研發(fā)和臨床應(yīng)用；對(duì)于免疫治療，全面的分子生物學(xué)檢測(cè)信息可為肺癌患者免疫治療的方案選擇、預(yù)后判斷，以及為臨床試驗(yàn)入組提供依據(jù)。

全面而精致的腫瘤基因診斷結(jié)果已經(jīng)成為肺癌臨床診療的剛需，二代測(cè)序（NGS）在這當(dāng)中具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。盡管目前NGS的應(yīng)用仍不及傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)，但未來(lái)是屬于NGS的。